ИСТИНА

Введение. Диагностика протоковой аленокарциномы поджелудочной железы (ПАПЖ) основывается на проведении биопсии, сопряжённой с риском осложнений [3]. Жидкостная биопсия - перспективный подход, позволяющий неинвазивно диагностировать данное заболевание. Одним из способов является анализ внеклеточной опухолевой ДНК (воДНК), содержащей мутации 12, 13 и 61 кодонов гена KRAS, с помощью цифровой капельной ПЦР (цкПЦР) [2]. Плазма является классическим субстратом, однако желчь содержит большее количество воДНК и рутинно собирается у 40-50% пациентов с ПАПЖ [1]. Цель. Оценка чувствительности и специфичности жидкостной биопсии плазмы и желчи с анализом воДНК пациентов с новообразованиями поджелудочной железы. Материалы и методы. В исследовании принимали участие 38 здоровых добровольцев, 95 больных с первичной ПАПЖ (у 20 собраны образцы желчи) и 18 пациентов с другими новообразованиями поджелудочной железы (ДНПЖ). ДНК получена из 5 мл плазмы и желчи. С помощью цкПЦР проведён анализ 12 наиболее распространённых мутаций 12, 13 и 61 кодонов гена KRAS. Результаты. ВоДНК обнаружена в плазме 61% пациентов с ПАПЖ (концентрация 5,08 [0; 17,55] копий/мл), у 1 из 18 пациентов с ДНПЖ (концентрация 2,34 копий/мл); у здоровых добровольцев не обнаружена. При анализе 20 парных образцов желчи и плазмы воДНК выявлена в 18 образцах желчи (концентрация 248,6 [6,743; 1068] копий/мкл) и в 11 образцах плазмы (концентрация 3,26 [0; 19,225] копий/мкл р = 0,001). Чувствительность и специфичность цкПЦР в дифференцировке ПАПЖ/группа контроля составила 61% и 100%, соответственно, а ПАПЖ/ДНПЖ – 61% и 94%, соответственно. Обнаружена корреляция между концентрацией в плазме воДНК и онкомаркёра СА19-9 (rs 0,302, p=0,003), а также ассоциация уровня воДНК с размером опухоли (р <0,05) и наличием отдалённых метастазов (р = 0,01). Общая выживаемость ниже у пациентов с наличием мутаций KRAS в плазме (отношение рисков 2,2 (95% ДИ: 1,1–4,4), р = 0,024) или уровнем воДНК в плазме, превышающим 4,735 копий/мкл (отношение рисков 2,4 (95% ДИ: 1,3-4,6), р = 0,005). Выводы. Жидкостная биопсия плазмы – перспективный метод диагностики и прогноза ПАПЖ. В то же время желчь содержит большее количество воДНК, что обуславливает большую чувствительность при анализе этого субстрата.