ИСТИНА

Основной целью проекта являлось выявление механизмов клеточного каннибализма в культивируемых нормальных и опухолевых клеток. Задача состояла в определении стадий этого процесса и анализе роли различных компонентов клетки в реализации программы клеточной гибели.

В ходе выполнения проекта, клеточный каннибализм обнаружен в субстрат-зависимых культурах А431, НаСаТ, СПЭВ и индуцированных к макрофагальной дифференцировке клетках ТНР-1. При сокультивировании нормальных и опухолевых клеток одного происхождения (НаСаТ и А431) и опухолевых клеток разного происхождения (А431 и MCF7) доказана возможность как гомотипического, так и гетеротипического каннибализма. При гомотипическом клеточном каннибализме нормальных и опухолевых клеток можно условно выделить несколько стадий. Адгезивное взаимодействие открепившейся от субстрата клетки с распластанной клеткой происходит на начальных этапах процесса. Активность сети актиновых филаментов обеспечивает первоначальное изменение формы обеих клеток, которое ведет к погружению ошаренной клетки в клетку-каннибал и образованию над внедрившейся клеткой крупной псевдоподии. Данный этап сопровождается значительным увеличением площади поверхности клетки-каннибала, которое обеспечивается антероградным везикулярным транспортом. Для этого в клетке-каннибале происходит пространственное перераспределение микротрубочек и аппарата Гольджи. Конечные стадии связаны с лизосомно-опосредованной деградацией внедрившейся клетки. Полное подавление клеточного каннибализма достигается путем нарушения начальных этапов при разборке аппарата Гольджи, сети микротрубочек или актиновых филаментов. Конечные стадии лизосомно-опосредованной деградации поглощенной клетки при этом не нарушаются. Кроме этого, проведенные исследования показали, что процесс клеточного каннибализма не препятствует продвижению по клеточному циклу клетки-каннибала, поглощенная клетка также продвигается по циклу до тех пор, пока не произойдет активация лизосомных гидролаз в составе каннибалической вакуоли. Блокирование клеток на границе G1/S, в S-фазе или в митозе не влияет на клеточный каннибализм. Опухолевые клетки способны участвовать в клеточном каннибализме, как в качестве каннибала, так и внедряющейся клетки, независимо от того, являются ли они одноядерными или содержат множество микроядер. В культуре опухолевых клеток А431 при восстановлении системы актиновых филаментов после разборки цитохалазином В возобновляется процесс клеточного каннибализма, а продолжительное воздействия цитохалазином В позволяет синхронизировать начало внедрения одной клетки в другую. Таким образом, нами разработана модель для исследования механизмов каждой из стадий клеточного каннибализма.